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大蛇丸死于自己被鼬祭杀。在《火影忍者》故事的后半部分，大蛇丸背叛了组织“晓”，并试图夺取宇智波佐助身上的力量。然而，在佐助愿意消灭大蛇丸并解救他的哥哥宇智波斑之后，鼬祭出现并与大蛇丸展开了一场生死对决。 在战斗中，鼬祭利用了他的迅速身手和精准的打击技巧，最终将大蛇丸的身体刺穿。大蛇丸意识到自己已经无法继续战斗，试图逃跑，但鼬祭再次追击他，并最终使出致命一击，将大蛇丸彻底击败。 在大蛇丸垂死之际，他向鼬祭解释了他的追求力量的动机和理念，同时也表达了对鼬祭的失望和愤怒。最后，大蛇丸向佐助致以最后的道别，声明佐助将成为他的真正继承者。随后，大蛇丸的意识逐渐消散，他终于死去了。

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